生物指示劑的歷史

19世紀(jì)末，一位英國(guó)醫(yī)生使用雞蛋作為生物指示劑，以雞蛋的凝固來(lái)判定滅菌效果，首次從概念上引入了生物指示劑。1955年，美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院（National Institutes of Health, NIH）使用嗜熱脂肪芽孢桿菌制備生物指示劑，因?yàn)樵摼鸁o(wú)致病性、無(wú)熱原、無(wú)毒，而且對(duì)壓力蒸汽的抵抗力在所有微生物中最強(qiáng)。

1957年，美國(guó)AMSOO公司在芝加哥的一次全美醫(yī)院協(xié)會(huì)上首先推薦市售商品化的生物指示劑。1965年美國(guó)藥典就提到已知微生物芽孢，1975年以后比較詳細(xì)論述了生物指示劑的有關(guān)參數(shù)。我國(guó)衛(wèi)生部也制訂了生物指示劑的有關(guān)法規(guī)。

定義和分類

在美國(guó)藥典中生物指示劑被定義為一種對(duì)特定的滅菌程序有確定的、穩(wěn)定的耐受性的特殊微生物制成品。

生物指示劑分類：
1）按結(jié)構(gòu)分可分為片狀生物指示劑(strip biological indicator)和自含式生物指示劑(self-contained biological indicator)；片狀生物指示劑需要使用陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照，而自含式生物指示劑只需要陽(yáng)性對(duì)照即可 。
2）根據(jù)ISO 11138-1(2017)的分類，目前的生物指示劑有環(huán)氧乙烷滅菌用生物指示物、濕熱滅菌用生物指示物、干熱滅菌用生物指示物、過(guò)氧化氫低溫等離子滅菌生物指示物和甲醛滅菌用生物指示物 。
3）按培養(yǎng)時(shí)間可分為通用型生物指示劑和快速型生物指示劑。通用型生物指示劑根據(jù)芽孢復(fù)蘇后指示菌種新陳代謝引起培養(yǎng)液pH值改變，通過(guò)酸堿指示劑變色來(lái)進(jìn)行判讀，時(shí)間一般在24或48小時(shí)以上；而快速型生物指示劑根據(jù)芽孢復(fù)蘇后的酶促反應(yīng)，通過(guò)熒光進(jìn)行判讀，時(shí)間一般為3-4小時(shí)。同時(shí)國(guó)外正在研發(fā)更加快速的生物指示劑，有望在1小時(shí)之內(nèi)得出結(jié)果。

生物指示劑的應(yīng)用

生物指示劑的應(yīng)用貫穿了滅菌工藝驗(yàn)證的整個(gè)流程。滅菌工藝驗(yàn)證包含了滅菌工藝開(kāi)發(fā)和滅菌程序確認(rèn)兩大部分。目前，常用生物指示劑進(jìn)行生物監(jiān)測(cè)指征。

由于生物指示劑能夠直觀反應(yīng)微生物在經(jīng)歷滅菌過(guò)程后的存活程度，生物指示劑的應(yīng)用并不局限于滅菌監(jiān)測(cè)。

生物指示劑可應(yīng)用于對(duì)滅菌設(shè)備進(jìn)行性能確證的輔助工作中以及特定物品的滅菌工藝研發(fā)以及建立工作中。

生物指示劑可應(yīng)用于終包裝或終容器內(nèi)產(chǎn)品的滅菌工藝驗(yàn)證，同樣可應(yīng)用于無(wú)菌過(guò)程中使用的滅菌設(shè)備、材料和包材組分滅菌工藝驗(yàn)證。

生物指標(biāo)也可用于已驗(yàn)證滅菌程序的定期再驗(yàn)證。生物指示劑還用于隔離器和無(wú)菌潔凈室滅菌工藝的驗(yàn)證評(píng)估。

生物指示劑性能評(píng)估

生物指示劑有2 項(xiàng)主要性能： 孢子數(shù)量和以D值表征的對(duì)滅菌工藝的抗性。

美國(guó)藥典要求生物指示劑生產(chǎn)廠家應(yīng)能提供效期內(nèi)的微生物總數(shù)數(shù)值、D值及D值測(cè)定方法等相關(guān)信息。生物指示劑使用者在應(yīng)用前能夠?qū)γ渴褂脝挝坏钠骄鋽?shù)進(jìn)行測(cè)定、對(duì)生物指示劑D值進(jìn)行評(píng)估。

生物指示劑的使用方法

1. 在生物指示劑標(biāo)簽上注明滅菌器鍋號(hào)，負(fù)荷數(shù)量，滅菌日期；不要在指示劑的瓶或蓋上另貼一個(gè)標(biāo)簽。將生物指示劑放于一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試包內(nèi)，并置于最難滅菌的位置。

2. 將含有生物指示劑的測(cè)試包放在滅菌器最難滅菌的位置，通常是滅菌器底層，近門或排氣口上面。

3. 正常裝載。

4. 滅菌循環(huán)完畢，取出生物指示劑。

5. 滅菌結(jié)束后，從滅菌器內(nèi)取出含有生物指示劑的測(cè)試包，打開(kāi)散熱5分鐘后才能取出生物指示劑。同時(shí)在壓碎安瓿之前，讓生物指示劑在培養(yǎng)鍋外再冷卻10分鐘后才能壓碎，然后進(jìn)行生物培養(yǎng)。

6. 檢查生物指示劑標(biāo)簽上的化學(xué)指示劑，顏色由玫瑰色變成棕色證明生物指示劑經(jīng)過(guò)壓力蒸汽滅菌過(guò)程的處理。該顏色的變化并非表明該處理達(dá)